Nuklein kislotasi ekstraktsiyasi yoki tozalash to'plami
Nukleik Acid Eekstraktsiya Or Tozalash Kityoki -20 ℃ da saqlanadi. Namuna 0 ℃ jingalak yordamida tashilishi kerak.
Introduction
Nuklein kislotasini olish yoki tozalash to'plami (magnit boncuklar usuli) avtomatlashtirilgan nuklein kislotasi ekstraktsiyasi vositalaridan foydalangan holda RNK va DNKni tana suyuqliklaridan (masalan, tamponlar, plazma, sarum) avtomatlashtirilgan tozalash uchun mo'ljallangan. Magnit-zarrachalar texnologiyasi yuqori sifatli DNK/RNKni ta'minlaydi, bu esa to'g'ridan-to'g'ri quyi oqim dasturlarida, masalan, kuchaytirish yoki boshqa fermentativ reaktsiyalarda foydalanish uchun mos keladi.
Application Range
To'liq qon, plazma, zardob va boshqa to'qimalar namunalari to'g'ridan-to'g'ri parchalanib, hazm qilindi. Chiqarilgan nuklein kislota super paramagnit nanometr magnit boncuklar tomonidan tanlab adsorbsiyalangan. Keyin oqsil, noorganik tuz ionlari va organik aralashmalar yuvish eritmasi bilan olib tashlandi. Nihoyat, nuklein kislota toza nuklein kislota eritmasini olish uchun eluent bilan elutildi.
Kit Contents
Mushuk. Yo'q. | YXN-VIRAL01-32A-BR | Komponentlar | ||
-50A | - 100A | |||
Hajmi | 32Tes | 50 Sinov | 100 test | |
Lizis buferi | 96 quduq Oldindan qadoqlash ed Plitalar 2 dona | 25 ml | 50 ml | Surfaktant va Tris |
Yuvish buferi I | ★15ml | ★30ml | Yuqori tuzli eritma | |
Yuvish buferi Il | ★6ml*2 | ★12ml*2 | Kam tuzli eritma | |
Elutsiya buferi | 10 ml | 20 ml | Kam tuzli eritma | |
MagaBio reagenti | 1,0 ml | 2,0 ml | Magnit zarralar | |
Qoʻllanma(=YXN-VIRAL01-32A-BR) | 1 | 1 | 1 | |
Notes:uchunYXN-VIRAL01-32A-BR-50A,ishlatishdan oldin ★15ml Wash Buffer I ga 15ml Absolute etanol qo'shing; Ishlatishdan oldin ★6 ml yuvish buferiga 24 ml mutlaq etanol qo'shing. | ||||
uchunYXN-VIRAL01-32A-BR-100A, ishlatishdan oldin ★30mL Wash Buffer I ga 30ml Absolute etanol qo'shing; Ishlatishdan oldin ★12 ml ga 48 ml mutlaq etanol qo'shing.【Foydalanuvchi tomonidan tayyorlanadigan reagentlar】Iltimos, mutlaq etanolni (analitik daraja) o'zingiz tayyorlang. |
Storage Conditions
To'plam kelgandan so'ng, to'plamning tarkibiy qismlari xona haroratida (15 - 25 ° C) saqlanishi mumkin. Reagentlar ishlab chiqarilgan kundan boshlab bir yilgacha barqaror.
Sample Requirements
1. Qo'llaniladigan namuna: tamponlar, plazma, sarum va to'liq qon va boshqalar.
2. Namunani saqlash va tashish: Namuna darhol sinovdan o'tkazilishi kerak
Materials va Devices Required but Not Provided
1. Bir marta ishlatiladigan kukunsiz qo'lqoplar
2. Biologik xavfli konteyner
3. Qalam yoki boshiga
Prosedure
Quyida biologik nuklein kislota ekstraktsiyasi vositasida ekstraksiya reagentining ishlash bosqichlarini qisqacha tushuntirish uchun misol sifatida namunali chiziqli ekstraksiya tampon losonidan foydalaniladi.Bioer NPA-32PyokiSMSANAT 32. Boshqa turdagi namunalar uchun foydalanuvchi qo'llanmasiga qarang. U, shuningdek, mijozlar tomonidan eksperimental sotib olish bo'yicha boshqarilishi mumkin:
1. Reaktiv Tayyorgarlik
a. uchunYXN-VB03-32A-50A va YXN-VB03-32A-100A
2,2 ml 96 chuqurlikli plastinkaning 1 va 7 ustunlariga 500uL Lizis buferi, 2 va 8 ustunlariga 500uL yuvish buferi I, 3, 4 va 9,10 ustunlariga 500uL yuvish buferi II qo'shing; 5 va 11-ustunlarga 70uL elutsiya buferi, 180uL toza suv va 6 va 12-ustunlarga 20uL MagaBio reagent (magnit boncuklar ishlatishdan oldin yaxshilab aralashtirilishi kerak),
b. uchunYXN-VB03-32A
96 ta yaxshi qadoqlangan reagentlarni xona haroratiga qo'ying. 96-quduqli plastinkani uch marta teskari silkiting va plastik qopni yirtib tashlang. Reagent naychalar devoriga yopishib qolmasligi uchun oldindan qadoqlangan reagentni bir necha soniya santrifüj qiling (yoki qo'l bilan bir necha marta silkiting). 96-quduqli plastinkaning alyuminiy folga plyonkasini yirtib tashlang va plastinka yo'nalishini aniqlang (6 va №12 ustunlardagi magnit boncuklar),
2.Namuna Ekstraksiya
1. 96 quduqli plastinka ustunlari №1 va №7 ga 300uL namuna qo'shing, iltimos, o'zaro ifloslanishdan saqlaning,
2. Asbobga 96 ta chuqur quduq plitasini joylashtiring, asbobga 8 ta chiziqli uchlarini o'rnating,
3. Dasturni quyidagi tartiblarga muvofiq ishga tushiring,
4. Avtomatik tozalash tugagandan so'ng, 5 va 11-ustunlardagi elutsiya tamponini toza yadroga qarshi 0,5 ml santrifüj naychasiga o'tkazing; Agar uni darhol ishlatmasangiz, iltimos, -20 ° C da saqlang.
Performance Characteristics
1. Ekstraksiya qilingan mahsulot 10 IU/ml sezgirlikka erishish uchun yuqori sezuvchanlik HBV DNKni aniqlash reagenti tomonidan aniqlanadi. Ekstraksiya qilingan mahsulot 50 IU/ml sezgirlikka erishish uchun yuqori sezuvchanlik HCV RNK aniqlash reagenti tomonidan aniqlanadi.
2. 4 ta namunani tanlang (zardob/plazma namunasi, nazofarengeal tampon namunasi, bachadon bo'yni eksfoliatsiyalangan hujayra namunasi), har bir namuna 10 marta 3 gradient bilan suyultiriladi (shu jumladan asl namunaning umumiy miqdori 4 ta konsentratsiya), ichki qonni aniqlash uchun malakali reagentlar va test agentlari yordamida mahsulot ko'rsatmalariga muvofiq mos yozuvlar geni va har bir partiyaning Ct qiymati 1 dan kam farq qiladi.
Step | Xo'sh Joylashuv | Program Ism | Waiting Time(min:SS) | Mixing Time(michida:SS) | Magnet Time(min:SS) | Aabsorbsiya | Ssiyish | Volume tatus (mkl) | Tharorat |
1 | 1 | Lyopa-singil | 0:00 | 2:00 | 0:00 | F | 700 | 80 | |
2 | 6 | Beads | 0:00 | 0:15 | 0:15 | √ | F | 200 | |
3 | 1 | Bind | 0:00 | 3:00 | 0:45 | √ | F | 700 | |
4 | 2 | Wkul1 | 0:00 | 0:30 | 0:30 | √ | F | 500 | |
5 | 3 | Wkul2 | 0:00 | 0:30 | 0:30 | √ | F | 500 | |
6 | 4 | Wkul3 | 0:00 | 0:30 | 0:30 | √ | F | 500 | |
7 | 5 | Elutsiya | 2:00 | 2:30 | 0:30 | F | 70 | 80 | |
8 | 6 | Bekor qilish | 0:00 | 0:15 | 0:00 | F | 200 |
Safety
1. GENERAL XAVFSIZLIK.
Ushbu mahsulotni foydalanuvchi hujjatlarida ko'rsatilmagan tarzda ishlatish shaxsiy shikastlanishga yoki asbob yoki qurilmaning shikastlanishiga olib kelishi mumkin. Ushbu mahsulotni ishlatadigan har bir kishi laboratoriyalar uchun umumiy xavfsizlik amaliyotlari va ushbu hujjatda keltirilgan xavfsizlik ma'lumotlari bo'yicha ko'rsatmalar olganligiga ishonch hosil qiling.
1.1 Asbob yoki qurilmani ishlatishdan oldin asbob yoki qurilma ishlab chiqaruvchisi tomonidan taqdim etilgan foydalanuvchi hujjatlarida keltirilgan xavfsizlik maʼlumotlarini oʻqib chiqing va tushunib oling.
1.2 Kimyoviy moddalar bilan ishlashdan oldin, barcha tegishli xavfsizlik ma'lumotlar varaqlarini (SDS) o'qing va tushuning va tegishli shaxsiy himoya vositalaridan (qo'lqoplar, xalatlar, ko'zni himoya qilish va boshqalar) foydalaning. SDS-larni olish uchun ushbu hujjatning "Hujjatlar va qo'llab-quvvatlash" bo'limiga qarang.
2. Kimyoviy xavfsizlik
UMUMIY KIMYOVIY QO'LLANISH. Xavflarni minimallashtirish uchun laboratoriya xodimlari quyida keltirilgan kimyoviy foydalanish, saqlash va chiqindilarga oid umumiy xavfsizlik yoʻriqnomalarini oʻqib chiqishlari va amaliyotga tatbiq etishlarini taʼminlang va maxsus ehtiyot choralari va koʻrsatmalari uchun tegishli SDS bilan maslahatlashing: Kimyoviy tomonidan taqdim etilgan Xavfsizlik maʼlumotlar varaqlarini (SDS) oʻqing va tushuning. har qanday kimyoviy moddalar yoki xavfli materiallarni saqlash, ishlov berish yoki ular bilan ishlashdan oldin ishlab chiqaruvchiga murojaat qiling.
2.1 Kimyoviy moddalar bilan aloqa qilishni minimallashtiring. Kimyoviy moddalar bilan ishlashda tegishli shaxsiy himoya vositalarini taqinglar (masalan, himoya ko'zoynaklari, qo'lqoplar yoki himoya kiyimlari).
2.2 Kimyoviy moddalarning inhalatsiyasini minimallashtiring. Kimyoviy idishlarni ochiq qoldirmang. Faqat etarli shamollatish bilan foydalaning (masalan, dudbo'ron).
2.3 Kimyoviy oqish yoki to'kilmasligini muntazam tekshirib turing. Agar sizib chiqsangiz yoki to'kilsa, SDSda tavsiya etilgan ishlab chiqaruvchining tozalash tartib-qoidalariga rioya qiling.
2.4 Kimyoviy chiqindilar bilan tutun qopqog'ida ishlang.
2.5 Birlamchi va ikkilamchi chiqindi idishlaridan foydalanishni ta'minlash. (Birlamchi chiqindilar
konteyner bevosita chiqindilarni saqlaydi. Ikkilamchi idishda asosiy idishdan to'kilgan yoki oqish mavjud. Ikkala konteyner ham chiqindi materiallarga mos kelishi va konteynerni saqlash uchun federal, shtat va mahalliy talablarga javob berishi kerak.).
2.6 Chiqindi idishini bo'shatgandan so'ng, uni taqdim etilgan qopqoq bilan yoping.
2.7 Laboratoriyangizda qo'llaniladigan maxsus ilovalar, reagentlar va substratlar natijasida hosil bo'ladigan chiqindilarni tavsiflang (agar kerak bo'lsa, tahlil qilish orqali).
2.8 Chiqindilarni barcha mahalliy, shtat/viloyat va/yoki milliy qoidalarga muvofiq saqlash, tashish, tashish va utilizatsiya qilishni ta'minlash.
2.9 Radioaktiv yoki bioxavfli materiallar maxsus ishlov berishni talab qilishi mumkin va utilizatsiya qilishda cheklovlar qo'llanilishi mumkin.
3.Biologik xavf xavfsizlik
Potentsial bioxavf. Ushbu asbobda ishlatiladigan namunalarga qarab, sirt bioxavf deb hisoblanishi mumkin. Bioxavfli moddalar bilan ishlashda tegishli zararsizlantirish usullaridan foydalaning.
BIOXAVOZ. To'qimalar, tana suyuqliklari, yuqumli agentlar, odamlar va boshqa hayvonlarning qoni kabi biologik namunalar yuqumli kasalliklarni yuqtirish imkoniyatiga ega. Barcha amaldagi mahalliy, shtat/viloyat va/yoki milliy qoidalarga rioya qiling. Tegishli himoya vositalarini taqing, jumladan, lekin ular bilan cheklanmagan: himoya ko'zoynak, yuz qalqoni, kiyim/laboratoriya xalati va qo'lqop. Barcha ishlar tegishli xavfsizlik uskunalari (masalan, jismoniy himoya vositalari) yordamida to'g'ri jihozlangan binolarda amalga oshirilishi kerak. Potentsial yuqumli materiallar bilan ishlashdan oldin shaxslar amaldagi me'yoriy hujjatlar va kompaniya/tashkilot talablariga muvofiq o'qitilishi kerak.
Quyidagilarda tegishli ko'rsatmalar va/yoki me'yoriy talablarni o'qing va ularga rioya qiling:
AQShda: AQSh Sog'liqni saqlash va inson xizmatlari departamentining Mikrobiologik va biotibbiyot laboratoriyalarida bioxavfsizlik bo'limida chop etilgan yo'riqnomalari: www.cdc.gov/biosafety.
Mehnatni muhofaza qilish va xavfsizlik standartlari, qon orqali yuqadigan patogenlar (29 CFR§1910.1030), quyidagi manzilda topilgan:
www.access.gpo.gov/nara/cfr/waisidx_01/29cfr1910a_01.html
Potentsial yuqumli materiallar bilan ishlash/ishlash uchun kompaniyangiz/muassasangizning Bioxavfsizlik dasturi protokollari. Bioxavf bo'yicha ko'rsatmalar haqida qo'shimcha ma'lumot: www.cdc.gov.
Yevropa Ittifoqida: Bioxavf va bioxavfsizlik boʻyicha ehtiyot choralari boʻyicha mahalliy yoʻriqnomalar va qonunchilikni tekshiring va Jahon sogʻliqni saqlash tashkiloti (VOZ) laboratoriya bioxavfsizligi boʻyicha qoʻllanma, uchinchi nashrda chop etilgan eng yaxshi amaliyotlarga murojaat qiling: www.who.int/csr/resources/publications /biosafety/WHO_CDS_CSR_LYO_200 4_11/uz/.